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41180000云顶集团登录的采样流程

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发布日期:2019-05-20 编辑: 点击:


1.收集血液

皮肤穿刺( 图1A ) 

戴上一副一次性乳胶橡胶手套。在皮肤穿刺之前,患者应该温暖他/她的手。手指按顺序进行按摩,使血液流向穿刺部位。用合适的消毒剂( 例如 70%异丙醇)清洁非书写手的第三或第四手指,手指的尖端远节点的手掌侧的皮肤,用 一次性安全采血针刺破皮肤。手指应保持在重力有利于指尖上的血液收集的位置。当通过皮肤穿刺收集毛细血管血液完成时,在指尖上放置绷带。

2.血斑的准备

通过皮肤穿刺收集的血液制备( 图1B和1C ),用纱布垫擦去第一滴血,因为它可能含有多余的组织液。再次按摩手指以增加穿刺部位的血流量。将下一个血滴转移到过滤卡的一个圆圈上,不要直接用指尖接触表面。仅通过毛细作用力将血液浸入过滤器的质地中。让指尖上的下一大滴毛细血管血液在下一个圆圈中收集。继续此过程,直到所有必要的圆圈都被填满或血流停止。如果血流量不足以填充过滤卡所需的所有圆圈,请勿过度挤压或“挤”手指。 如果血流停止,则在指尖上放置绷带。 如果检查需要更多血液,则在另一根手指上进行第二次皮肤穿刺。

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3.血液干燥

为了干燥血斑,将滤纸放在生物危害安全柜中的干净纸巾上,让它们在没有任何外部热源的情况下在室温下干燥,优选O / N(但至少4小时)。当干燥过程完成时,血斑具有均匀的深褐色,并且不再可见红色区域( 图1D )

4.干血点的储存和运输(DBS)

注意:干燥后可以中断血斑的处理。41180000云顶集团登录现在可以存储,储存时,将滤纸卡放入一个不透气的血样袋中,该袋包含1到2个干燥剂袋,以保护样品免受潮湿( 图1E )。(可选)添加湿度指示卡。将此袋尽快转移到温度为-20°C或更低的冰箱中。如果在现场条件下无法使用冷冻机,则可在-4°C或甚至在环境温度下储存长达14天。在干冰上运输冷冻DBS标本。对于Z初保持在环境温度的41180000云顶集团登录,使用三重包装系统,其由作为内部容器的拉链袋以及内部和外部封套组成。外包装上不需要通过普通邮件装运内容标记,但必须将国际生物危害标志贴在主容器上 。如果干燥剂包和/或附加湿度指示卡变为粉红色,则排除过滤卡进一步处理。

5.干血斑的洗脱

使用一次性使用的6毫米设备从903级41180000云顶集团登录的每个血液浸泡的圆圈中打出一个点( 图1F)。将所有穿孔的干血斑从单个患者转移到12孔板的一个孔中。用含有0.05%吐温20和0.08%叠氮化钠的磷酸盐缓冲盐水填充孔( 图1G )。使添加的缓冲液的体积适应用于随后分析干血斑洗脱液的测定的Z小相应要求。重复这些步骤以获得第二系列干血斑洗脱液以进行分子分析。

将细胞培养板置于实验室振荡器上,让打孔干燥的血斑轻轻洗脱至少4小时,或优选O / N( 图1H )。

第二天,斑点几乎没有血液并且已形成溶血上清液( 图1I )。将这些洗脱液转移到微量离心管中。然后,使它们以10,500×g离心2分钟( 图1J )以从洗脱期间形成的任何碎片中释放上清液( 图1K )。

6.洗脱液分析

离心洗脱液现在可以用于预期的分析。使用市售试剂盒研究乙型肝炎病毒,丙型肝炎病毒和HIV感染标志物的洗脱液,并仔细遵循各自制造商的说明( 图1L )。

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