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FTA41180000云顶集团登录纯化DNA的好处

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发布日期:2019-05-10 编辑: 点击:


FTA41180000云顶集团登录纸是一种商业产品(Whatman由浸渍了专利混合化学品的滤纸组成,用于溶解细胞,防止细菌生长,并保护样本中的DNA

使用FTA41180000云顶集团登录纸纯化DNA的基本前提很简单:将生物样品应用于FTA41180000云顶集团登录纸并风干。 然后取出FTA纸的小圆盘,并洗涤以去除任何非DNA材料(DNA仍然缠绕在纸中)。随后可以对DNA进行分析,同时仍然附着在纸上,或者可以在使用前洗脱DNA

在该资讯中给出了洗涤和加工程序的实例,以及以这种方式处理的DNA的实用性。

样品选择和收集

对于脊椎动物,选择的常见样本通常是血液或血液凝块,因为细胞通常仍然存在并且DNA通常具有高质量。处理后,每单位面积FTA41180000云顶集团登录DNA浓度在每个物种中通常也相当稳定。这种可靠性通过在分析之前消除DNA定量的需要而简化了许多程序。虽然更多变化,但在FTA上沉积的面颊擦拭物和唾液是令人满意的样品,尽管这些样品包括一些已被凋亡核酸酶和细菌DNA损坏的DNA。只要动物的某些DNA完好无损,这些对PCR等程序都不重要; 然而,由于存在高度可变量的DNA,它可能引起扩增变异。

血液

将含有抗凝血剂的生血或血液滴在储存纸上并放置3-5分钟直至干燥。如果非常需要样品沉积的均匀性(即对同一样品进行多次分析),那么样品应该快速地运行到表面上,因为细胞在与纸接触后很快就会裂解,并且样品的非常缓慢的递送往往导致局部化裂解,因此DNA的不均匀扩散。可以将几个直径约为1厘米(20微升血液)的样品放在同一张存储纸上,理想情况是它们之间有小的空载“白色”区域,以确保纸张没有严重超载并确保足够的样品分离。面积仅为1-2毫米的血液样本对于至少12次分析是足够的,并且多达50种依赖于物种。

血块

死亡的动物或快速凝固的样本可能使血凝块成为唯一的DNA来源。理想情况下,将直径3-5毫米的凝块轻轻挤入屏蔽手指和拇指之间的FTA纸张纹理中。通过使用诸如聚乙烯之类的可丢弃塑料薄片的简单护罩,避免了污染手指的交叉污染。 然后将纸干燥为液体血液样品。 挤压凝块内DNA的分布可能是不均匀的,大多数DNA位于该区域的中心2/3处。

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